کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) سری R 2500 برند REINHELDT

کروماتوگرافی یکی از مهم‌ترین و پرکاربردترین روش‌های جداسازی شناخته شده در شیمی می‌باشد. کروماتوگرافی بر اساس تفاوت سرعت مهاجرت اجزای یک مخلوط بر روی فاز ساکن در حین عبور فاز متحرک بنا شده است. سرعت متفاوت اجرای یک مخلوط در طول بستر مهاجرت، از توزیع نابرابر آن‌ها بین دو فاز ساکن و متحرک ناشی می‌شود. این مطلب توسط ضریب تقسیم نشان داده می‌شود: K=Cs/Cm که در آن Cs و Cm به ترتیب غلظت هر جزء در فاز ساکن و متحرک بوده و K نیز ضریب تقسیم می‌باشد.
کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) روشی است که در آن یک ماده‌ی جامد، مایع یا رزین تبادل یونی به عنوان فاز ساکن در یک ستون جای گرفته و فاز متحرک با فشار از آن عبور می‌کند. در این روش نمونه مورد آزمایش از محل تزریق وارد دستگاه می‌شود و در این حین حلال نیز جریان داشته که نقش فاز متحرک را دارد. نمونه مورد آزمایش و فاز متحرک از طریق لوله‌های انتقال بسیار باریک به طرف ستون هدایت می‌شوند. جداسازی اجزای یک مخلوط بر اساس چسبیدن یا پخش آن‌ها روی فاز ساکن موجود در ستون صورت می‌گیرد. از این رو در حین عبور فاز متحرک از بستر ستون کروماتوگرافی، نمونه مورد آزمایش به اجزای سازنده‌ی خود تفکیک می‌گردد. خروجی ستون از یک یا چند آشکارساز عبور کرده و آشکارساز نیز یافته‌های خود را به ثبات منتقل می‌کند و ثبات وجود هر جزء را به صورت یک پیک نشان می‌دهد. برای اینکه پیک‌ها به طور کاملاً مشخص رسم شوند به یک سیستم پمپ‌کننده‌ی دقیق نیاز است. عمل پمپ به این صورت است که حلال را از مخزن آن گرفته و با سرعت ثابتی آن را به داخل سیستم وارد می‌کند. اگر در اثر تزریق نمونه، جداسازی صورت نگیرد باید پارامتر‌های مختلفی مانند سرعت جریان حلال، طول ستون، نوع آشکار ساز، ماده پر‌کننده‌ی ستون و قطر ستون را تغییر داد تا بهترین تفکیک صورت گیرد. کرومتوگرافی مایع با کارایی بالا برای تجزیه کمی و کیفی مواد دارویی، شیمیایی، غذایی، پلیمر‌ها، پروتئین‌ها و نوکلئیک اسید‌ها به کار می‌رود.
دستگاه کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا دارای قسمت‌های سیستم مخزن حلال (شامل مخزن و ظرف تقسیم‌کننده)، پمپ‌ها، سیستم تزریق نمونه، ستون کروماتوگرافی، آشکارساز و سیستم ثبات می‌باشد.
آشکارساز‌های متداول در کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا عبارتند از:
• طیف سنج فرابنفش (UV)
• ضریب شکست (RID)
• فلورسانس (FLD)
• چند کانالی یا آرایه دیود (DAD)

مشاهده بروشور کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) سری R 2500 برند REINHELDT